手把手教你设计引物（图文并茂）

4. 然后点击 CONFIGURE THIS PAGE 进入设置你要显示的内容

5. 除了第一栏 SHOWEXONS 选择 YES 外，其他的都选择 NO，然后取个名字保存 SAVE CONFIGURATION AS

6. 然后在左侧栏点击 DOWNLOADVIEW AS RTF 可下载你要的 cDNA 序列，这个文件可以用 WORD 打开，不同的颜色代表一个外显子间断

下载后打开的 WORD

7. 然后根据可以根据你感兴趣的序列设计引物了，比如我在分别在第 6 和第 7 外显子分别设计上下游引物。选取并复制第 6 和第 7 外显子序列

8. 登陆 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/，粘贴这段序列，设置好 RANGE 和 PCR 产物的大小，然后在下面点击 GET PRIMERS，可以在线设计并比对引物

9. 最后选择一个比较特异性的引物，条带大小要尽量单一，其他的基因序列尽量不要比对到

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